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1、按照試劑說明書的步驟配制樣品溶液,分別取100微升底物試劑,注入對照液試和樣品液中。然后分別將對照液和樣品液倒入比色皿中。
2、將樣品溶液比色皿放入相應(yīng)通道,合上遮光板,點(diǎn)擊樣品名稱按鈕選擇【樣品名稱】,點(diǎn)擊檢測,注意檢測時(shí)間和對照溶液保持一致。
3、點(diǎn)擊反應(yīng)時(shí)間,設(shè)置對應(yīng)的樣品反應(yīng)時(shí)間。
4、進(jìn)度條完成后,顯示檢測結(jié)果。如需打印,點(diǎn)擊【打印】按鍵,點(diǎn)擊打印后,數(shù)據(jù)自動(dòng)保存。
5、連續(xù)測量其他樣品,重復(fù)2--5步驟。
【試劑配制】
緩 沖 液:取一包緩沖試劑用500ML蒸餾水搖勻溶解后常溫備用
底 物:取一瓶加入10ML蒸餾水搖勻溶解,配制后放在0-5℃冷藏保存
膽堿酯酶:取一瓶加入10ML緩沖液 搖勻溶解,配制后放在0-5℃冷藏保存
顯 色 劑:取一瓶加入10ML 緩沖液搖勻溶解,配制后放在0-5℃冷藏保存
注:無蒸餾水可使用純凈水替代(如:娃哈哈純凈水)
【檢測樣本制備】
1、取有代表性果蔬除去泥土,天平稱取2g,葉菜取葉片部分,瓜果取皮(越薄越好)4g
2、將樣品剪成1cm2大小(不宜剪太小)于樣品杯內(nèi),加入10ML緩沖液,輕微震蕩1~2分鐘
3、過濾(或靜置3~5分鐘后取上清液)即為樣本提取液(提取液應(yīng)澄清透明)
【測試】
1、取適量試管,其中一支加入2.5ML緩沖液做空白對照,其余依次加入2.5ML待測樣本液
2、所有試管分別依次加入酶100ul,顯色劑100ul(搖勻,37℃培養(yǎng)10分鐘)
3、培養(yǎng)后依次加入底物100ul
4、搖勻后立即倒入比色皿中,然后立即放入儀器內(nèi),空白對照放入第一通道,樣品放入其余通道,按“檢測”鍵等待檢測結(jié)果,結(jié)果△AO應(yīng)≥0.3,試劑空白活性△AO<0.3后更換新試劑
【結(jié)果判定】
抑制率<50%時(shí)判定為合格;抑制率≥50%時(shí)農(nóng)藥殘毒超標(biāo),超標(biāo)樣需復(fù)檢確認(rèn),必要時(shí)可進(jìn)行定量檢測
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